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分子生物学基础
新冠病毒qPCR检测, 模板如何进行前处理?
本文以新冠病毒qPCR检测为例,从样本采集与转运、病毒灭活与裂解、核酸提取、质量评估、逆转录及qPCR体系配置五个方面,系统阐述模板前处理的技术要点、实验流程、注意事项及优化策略,为临床和科研实验室构建高效、稳定的qPCR检测体系提供参考指导。
PCR实验室中如何使用UDG/UNG防污染体系?
基于尿嘧啶-DNA糖苷酶(UDG,又称UNG)体系的污染预防策略,通过在PCR产物中掺入含尿嘧啶嘌呤(dUTP)并在扩增前利用UDG特异性切除含尿嘧啶的DNA残留,从而有效消除前次扩增残留的污染模板,确保实验准确性。
qPCR 的绝对定量与相对定量
实时荧光定量 PCR(qPCR)不仅可以检测样品中目标核酸的存在,还能对其数量进行精确定量。根据定量过程是否依赖已知浓度的标准品,qPCR 定量可分为“绝对定量”与“相对定量”两种主要模式。绝对定量旨在测定样品中靶标分子的绝对拷贝数,而相对定量则重点关注不同实验组之间目标基因表达水平的相对差异。
PCR实验室核酸检测的常见问题分析
检验科人员是核酸检测工作的主力军,我们不但要保证检测结果的有效性,还时刻面临着被感染的风险。本文为大家讲解《PCR实验室新冠核酸检测操作注意事项》,重点从新冠病毒生理特性、荧光PCR原理、PCR实验室筹备规范、样本检测环节操作、实验室数据分析、常见问题解析等几个方面讨论学习。
RPA恒温扩增技术知多少?
在核酸检测领域,传统的PCR技术因依赖精密温控设备和复杂的操作流程,难以满足即时检测(POCT)和资源有限场景的需求。而重组酶聚合酶扩增技术(Recombinase Polymerase Amplification, RPA)作为一种革命性的恒温扩增技术,凭借其快速、便携、高灵敏度的特点,正在成为分子诊断领域的“新宠”。本文将带您全面了解这项技术的原理、应用及未来前景。
qPCR引物设计基础
定量PCR(qPCR)已经成为基因表达分析、基因突变检测、病原体检测等领域的标准技术。引物作为qPCR实验中的关键组成部分,其设计直接影响实验的准确性和效率。本文将探讨qPCR引物设计的基础知识,介绍常见的设计策略,并分享一些优化引物的实践经验,帮助科研人员提升qPCR实验的可靠性。
qPCR引物探针稀释与使用,你会吗?
定量聚合酶链式反应(Quantitative Polymerase Chain Reaction, qPCR)作为分子生物学中的核心技术,因其高灵敏度、高特异性和实时检测能力,广泛应用于基因表达分析、病原体检测和遗传变异研究。自新冠疫情爆发以来,qPCR成为新冠病毒核酸检测的金标准,其快速、准确的特点在疫情防控中发挥了关键作用。然而,qPCR实验的成功与否,很大程度上依赖于引物和探针的设计、稀释与使用是否得当。
实时荧光定量PCR(RT-PCR, qPCR)
实时荧光定量PCR(RT-PCR, qPCR)是一种在PCR扩增过程中实时监测荧光信号的方法,它允许在反应进行时实时收集数据,而不是在PCR扩增结束后才进行数据分析。这种方法使得DNA或RNA的定量变得更加精准和高效,广泛应用于基因表达分析、病原体检测、基因拷贝数的测定等领域。
TaqMan与荧光染料法(SYBR Green)在实时定量PCR中的应用比较
实时定量PCR(qPCR)技术自上世纪末发展以来,已经成为分子生物学研究中最重要的技术之一,广泛应用于基因表达分析、病原体检测、基因拷贝数的测定等多个领域。实时PCR的关键在于如何准确、灵敏地检测目标DNA或RNA的含量,而这一点正是通过荧光检测技术来实现的。两种最常见的实时PCR检测方法分别是TaqMan探针法和SYBR Green染料法。这两种方法在PCR反应中的应用有着不同的特点,包括灵敏度、特异性、成本、实验设计的复杂度等。本文将对这两种方法的原理、优缺点、应用场景等进行全面比较,为科研人员提供参考。
如何解读美国药典《mRNA疫苗质量分析方法-指南草案》
RNA疫苗是一种革命性的技术,通过将信使RNA(mRNA)引入人体,指导细胞生成特定蛋白质以触发免疫反应,例如用于COVID-19的疫苗。这种技术的快速发展和广泛应用使得质量控制成为确保疫苗安全性和有效性的关键环节。疫苗的质量不仅影响其疗效,还直接关系到公众的健康和对新技术的信任。你是否思考过,mRNA疫苗的质量如何通过科学方法得到保障?
环状mRNA制备技术:引领核酸药物新浪潮
环状RNA(Circular RNA, circRNA)作为一种新型的闭合环状结构RNA分子,凭借其高稳定性、长半衰期、免疫原性低以及独特的生物学功能,正迅速成为生物医药领域,特别是核酸药物和疫苗开发的新焦点。本文将深入探讨环状mRNA的制备技术、生物学功能、应用前景以及面临的挑战,旨在为相关研究和产业化提供参考,并展现其作为珲信网站宣传内容的价值。
mRNA序列设计:从基础到优化
随着mRNA药物技术的迅猛发展,mRNA序列设计已成为推动这一领域进步的核心环节之一。从新冠疫苗的快速研发,到基因治疗、癌症免疫疗法以及其他创新医疗技术的应用,mRNA序列的设计质量直接决定了其翻译表达效率、免疫原性以及最终的治疗效果。本文将系统阐述mRNA序列设计的基本原理、关键步骤、优化策略以及当前的最新技术进展,旨在为相关研究人员提供理论与实践相结合的参考。
mRNA药物技术前沿:从基础研究到临床应用
mRNA药物技术近年来取得了革命性的突破,特别是在新冠疫情爆发后,mRNA疫苗如辉瑞-BioNTech和Moderna疫苗的成功问世,标志着这一领域的成熟。然而,mRNA技术的潜力远不止疫苗,其在基因治疗、癌症免疫治疗以及其他领域的应用前景广阔。本文将回顾mRNA药物技术的进展,分析当前技术的前沿突破,并探讨该领域的未来发展趋势。
揭秘mRNA加帽率检测:从基础方法到前沿技术
自新冠疫情以来,mRNA技术因其在疫苗开发中的卓越表现而成为全球关注的焦点。从快速应对传染病到开发癌症疫苗和治疗遗传性疾病,mRNA展现了颠覆传统医疗的巨大潜力。而在这背后,5'端帽结构(Cap)作为mRNA的关键组成部分,不仅是翻译效率的“启动钥匙”,还在分子稳定性中扮演重要角色。加帽率作为mRNA质量的核心指标,直接影响其功能和临床应用,必须通过精准的检测方法进行全面表征。近日,伦敦帝国理工学院在《Current Opinion in Systems Biology》上发表综述[1],系统回顾了mRNA加帽率分析的最新技术。本文将深入解读这些方法的原理与进展,带您探索这一领域的科学前沿。
美国药典《mRNA疫苗质量分析方法-指南草案》第二版推动mRNA疫苗质量控制的里程碑
自新冠疫情以来,mRNA疫苗以其快速开发和高防护效能成为全球关注的焦点。从Moderna和Pfizer-BioNTech的COVID-19疫苗,到mRNA技术在癌症治疗和遗传病领域的扩展应用,这一技术展示了生物医药领域的巨大潜力。然而,mRNA疫苗的快速发展也带来了质量控制的挑战。作为一种新型疫苗平台,mRNA的生产过程无细胞依赖,涉及复杂的酶促反应和脂质纳米颗粒(LNP)递送系统,其关键质量属性(Critical Quality Attributes, CQAs)与传统蛋白疫苗显著不同。
蛋白表达优化的关键策略
在生命科学研究和生物制药开发中,高效、可重复的重组蛋白表达是许多实验的基础。无论是结构与功能研究、抗体制备,还是工业化生产,都需要针对不同蛋白的特性,通过多方面的策略全面优化表达水平和质量。蛋白表达优化既包括基因层面的设计,也涵盖载体与宿主的选择、培养条件与诱导方案的调整,还需关注蛋白折叠与溶解、下游纯化等环节的协同配合。本文将从基因设计、载体构建、宿主体系、培养与诱导条件、标签与融合策略、折叠与溶解、发酵与规模化生产、以及纯化与分析等多个维度,详述蛋白表达优化的关键策略,为科研与工程实践提供参考。
解码生命:DNA 双螺旋的秘密
你知道吗?在你身体的每一个细胞中,都藏着一个微小的分子,它就像一本记录了你生命秘密的书。这本书的文字就是脱氧核糖核酸(DNA)。DNA不仅决定了你的眼睛颜色、身高,甚至你的性格倾向,还指导着细胞如何工作,让你成为独一无二的你。1953年,科学家詹姆斯·沃森和弗朗西斯·克里克揭开了DNA的结构——一个优雅的双螺旋,彻底改变了我们对生命的理解。
生物学中心法则:生命信息的传递与表达
生物学中心法则(Central Dogma of Biology)是现代分子生物学的基石,由弗朗西斯·克里克(Francis Crick)于1958年首次提出。这一理论描述了遗传信息在生物体内的传递和表达过程,即从DNA到RNA再到蛋白质的单向流动。它不仅揭示了生命的基本机制,还为基因工程、生物技术产品的开发以及疾病治疗提供了理论基础。对于使用生物学产品的用户来说,理解中心法则的原理及其应用至关重要,因为它直接关系到基因表达调控、蛋白质合成以及相关实验设计的逻辑。